差速離心
用于細(xì)胞分級的常用技術(shù)稱為差速離心,它用于從液體培養(yǎng)基中分離顆粒或?qū)⒉煌|(zhì)量的顆粒分離成上清液的單獨部分。我們將在本課程中以多種方式使用此技術(shù)。
1.在Bio 242淀粉酶實驗室中,我們將使用離心法在酶提取物制備過程中沉淀細(xì)胞碎片和過量淀粉。可溶的酶將保留在上清液中。在實際實驗過程中,我們將使用離心分離酶(可溶性)從其底物(不溶性直鏈淀粉 - 天青)中止反應(yīng)。
2.在分子實驗室中,我們將使用離心來促進(jìn)微量離心管底部的少量反應(yīng)物的化學(xué)反應(yīng)。我們還將使用離心來制備用于轉(zhuǎn)化的細(xì)菌細(xì)胞,交替造粒,然后用不同的化學(xué)溶液重新懸浮。
3.在希爾反應(yīng)實驗室中,我們將使用多步差速離心從粗細(xì)胞勻漿中分離細(xì)胞器(葉綠體)。由于細(xì)胞器的質(zhì)量遠(yuǎn)小于細(xì)胞壁組分,所以在低離心力下形成的**個顆粒主要是細(xì)胞碎片。然后在較高的離心力下沉淀細(xì)胞器部分。